核酸的提取
核酸包括dna、rna两种分子，在细胞中都是以与蛋白质结合的状态存在，核酸提取的主要步骤为：裂解细胞
去除与核酸结合的蛋白质以及多糖、脂类等生物大分子，去除其他不需要的核酸分子，如提取dna分子时，应去除rna，反之亦然。
沉淀核酸
纯化核酸，去除盐类，有机剂等杂质
（一）dna提取的经典方法
dna提取的经典方法，即所谓的酚-氯仿提取法。因为使用两种不同的有机溶剂交替抽提更容易将蛋白除去，提取次序为酚、酚/氯仿（1：1）、氯仿，这种方法提取的dna纯度高、片段大、效果好，缺点是较为繁琐。
说明：
回收上层水相时，一定不要接触两相的界面，以免将蛋白质等物质吸入新离心管。沉淀dna，无水乙醇是首选的有机溶剂。另：异丙醇、醋酸钠等。
70%乙醇漂洗dna，是为了去除残余的盐类，去除过量sds和酚等杂物，因为sds在70%的乙醇中保持溶解状态，不与dna共沉淀，从而通过弃上清液去除这种去污剂，避免对以后pcr反应的影响。te缓冲液：10mmol/ltris-hcl1mmol/ledtaph8.5或8
rna的提取
rna提取条件较dna要求严格，主要是因为临床标本及实验室环境中，存在大量对rna有强烈降解作用rnase。rnase是一类生物活性非常稳定的酶类。这种酶耐酸、耐碱、耐高温，如煮沸也不能使之完全失活。蛋白质变性剂可使之暂时失活，但变性剂去除后，又可恢复活性。除细胞内rnase以外，环境中灰尘、各种实验器皿和试剂、人体的汗液及唾液中均存在rnase，因此在提取rna时，关键要避免rnase对标本的污染及防止rnase对提取的rna的降解。
1.提取rna所用器皿的处理及溶液的准备
塑料制品。如试管、ep管、tip头，使用灭菌的一次性用品。
玻璃用品。如烧杯、试管和其他用品，常被rnase污染，使用前必须于180oc干燥8小时以上，或用0.1轕c水（焦碳酸二乙酯）浸泡处理。
depc是rnase的强抑制剂，作用机制是通过与蛋白质中的组氨酸结合，使蛋白质变性。37℃浸泡2小时，然后用灭菌水漂洗数次，于100℃干烤15分钟，去除器皿上残余depc。
所需溶液的配制。必须用高压灭菌的水和rna提取专用的化学试剂配制溶液，用干烤过的药匙称取试剂，把溶液装入无rnase的玻璃器皿。
严格来说，所有溶液均应用0.1轕c于37℃处理12小时以上，然后于100℃加热15分钟或高压灭菌15分钟，去除残余depc。
2.rna提取中rnase污染的控制
最主要的潜在污染源是操作人员的手，手直接触摸之处毫无疑问会留下rnase，另外，说话带出的唾液也富含rnase，故在涉及rna的一切操作过程中，都应戴一次性手套和口罩。实验中，如接触了“脏的”玻璃器皿和其他物品以后，手套就可能污染rnase，因此rna提取实验中，应勤换手套。rna提取方法
下面以异硫氰酸胍结合氯仿-酚提取法介绍rna的提取。
异硫氰酸胍是一种强用力的蛋白质变性剂，能迅速溶解蛋白质，导致细胞结构破碎，核蛋白由于其二级结构的破坏消失而迅速与核酸分离。
rnase虽可耐受多种处理，（如煮沸）而不失活，但却会被4mol/l异硫氰酸胍和-β巯基乙醇（破坏rnase蛋白质中的二硫键）等还原剂所灭活，因而可从组织中分离出完整rna分子。
因此上述试剂是制备rna的常规试剂。
200µl血清（浆）
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加入200µl20%peg6000
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4oc，3小时，12000rpm，4℃离心15分钟
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弃上清，加500µl裂解液（含异硫氰酸胍、-β巯基乙醇等），混匀
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