[受褐飞虱诱导的水稻酵母双杂交文库的构建] 抗褐飞虱水稻
摘要：
为了研究水稻抗褐飞虱的分子机制，构建了受褐飞虱取食诱导的水稻的酵母双杂交文库。检测结果表明构建的文库容量为２.２２×１０６cfu，文库滴度为５.４×１０７cfu／ｍＬ，文库ｃＤＮＡ插入片段长度主要分布在７００～１０００ｂｐ之间。
关键词：褐飞虱；水稻；酵母双杂交文库
中图分类号：Ｑ８１２文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０11）15－3201-03
ＣｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｏｆＹｅａｓｔＴｗｏ－ｈｙｂｒｉｄＬｉｂｒａｒｙｏｆＲｉｃｅＩｎｆｅｓｔｅｄｂｙＢｒｏｗｎＰｌａｎｔｈｏｐｐｅｒ
ＺＨＵＬｉ－ｌｉ，ＨＵＬｉａｎｇ，ＤＵＢｏ
（ＳｃｈｏｏｌｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅ，ＷｕｈａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｗｕｈａｎ４３００７２，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｒｉｃｅｔｏｂｒｏｗｎｐｌａｎｔｈｏｐｐｅｒ，ｙｅａｓｔｔｗｏ－ｈｙｂｒｉｄｌｉｂｒａｒｙｏｆｒｉｃｅｉｎｆｅｓｔｅｄｂｙｔｈｅｉｎｓｅｃｔｗａｓｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄ.Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆｄｅｔｅｃｔｉｏｎｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｌｉｂｒａｒｙｃｏｎｔａｉｎｅｄ２.２２×１０６ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｃｌｏｎｅｓ；ｔｈｅｔｉｔｅｒｏｆｌｉｂｒａｒｙｗｅｒｅ５.４×１０７cfu／ｍＬ.Ｔｈｅｓｉｚｅｏｆｍｏｓｔｉｎｓｅｒｔｓｗｅｒｅ７００～１０００ｂｐｉｎｔｈｅｌｉｂｒａｒｙ.
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｂｒｏｗｎｐｌａｎｔｈｏｐｐｅｒ；ｒｉｃｅ；ｙｅａｓｔｔｗｏ－ｈｙｂｒｉｄｌｉｂｒａｒｙ
褐飞虱（ＮｉｌａｐａｒｖａｔａｌｕｇｅｎｓＳｔ。�ｌ.，ＢＰＨ）是对水稻危害最严重的害虫之一，严重威胁水稻的高产和稳产［１］。在水稻生产中，依靠化学杀虫剂防治褐飞虱不仅可能引起褐飞虱的再猖獗，还会造成环境污染［２］。目前认为，培育并推广种植抗褐飞虱水稻品种是综合防治褐飞虱最为经济有效和环境友好的方法［３］。迄今为止，人们在野生稻和栽培品种中定位了２１个抗褐飞虱的主效基因［４］，并成功地克隆了水稻抗褐飞虱基因Ｂｐｈ１４［５］，但水稻抗褐飞虱的分子机制仍不清楚。近年来，科学家们应用多种方法，如ｃＤＮＡａｒｒａｙ、抑制差减杂交、ｃＤＮＡＭｉｃｒｏａｒｒｙ以及ｉＴＲＡＱ技术等，从ＤＮＡ、ＲＮＡ和蛋白质水平对抗、感水稻品种受褐飞虱取食诱导后的变化进行了探索［６－９］。这些研究表明，褐飞虱的取食导致了水稻体内与细胞防御、细胞传递、大分子代谢、信号传导等相关的基因和蛋白表达显著的改变。然而，这些报道都是大范围地进行水稻抗褐飞虱分子机制的探索。抗褐飞虱相关基因与哪种蛋白相互作用，从而介导抗性反应则完全不清楚。
酵母双杂交技术是一种研究蛋白质之间相互作用的有效手段，不但可以检测已知蛋白质之间的相互作用，更重要的在于发现与已知蛋白相互作用的未知蛋白，是一种成熟的研究蛋白间相互作用的方法。本研究构建褐飞虱取食水稻品种９３１１的酵母双杂交文库，为筛选抗褐飞虱基因互作蛋白分子，并进一步研究水稻抗褐飞虱的分子机理奠定基础。
１材料和方法
１.１实验材料
建库所用水稻品种为９３１１；所用褐飞虱饲养在武汉大学植物遗传研究所的水稻品种台中本地一号（ＴＮ１）上。构建酵母文库的试剂盒购自Ｃｌｏｎｔｅｃｈ公司，ＲＮＡ提取试剂盒购自Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎｅ公司。
１.２方法
(未完，全文共5727字，当前显示1427字)
(请认真阅读下面的提示信息)
