第一篇。pcr检验聚合酶链式反应是一种用于放大扩增特定的dna片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊dna复制，pcr的最大特点，是能将微量的dna大幅增加。因此，无论是化石中的古生物、历史人物的残骸，还是几十年前凶杀案中凶手所遗留的毛发、皮肤或血液，只要能分离出一丁点的dna，就能用pcr加以放大，进行比对。这也是“微量证据”的威力之所在。由1983年美国mullis首先提出设想，1985年由其发明了聚合酶链反应，即简易dna扩增法，意味着pcr技术的真正诞生。到如今2013年，pcr已发展到第三代技术。1973年，台籍科学家钱嘉韵，发现了稳定的taqdna聚合酶，为pcr技术发展也……查看全文>>
第一篇。pcr过程问题全解如何防止pcr形成引物二聚体。在pcr后的电泳带形成很宽很亮的带，对照marker时都不容易看出其大小，具体是什么原因呢。pcr时模板dna浓度一般是多少最合适。答。1这条亮带如果在100bp一下就可以考虑是引物二聚体了，形成引物二聚体的原因很多，如引物设计的不好，在两端容易形成回文结构或是两条引物之间也可能会互补配对；退火温度没有达到最佳，实在不行就做个温度梯度吧；再就是试着改变一下循环数，也许会有帮助。pcr模板大约在104-106个拷贝。答2。我觉得是目的条带含量太多了，如果点样太多，负载量太大，就会造成跑胶时条带太宽。可以试着减少模板量，稀释10倍或是减少循环……查看全文>>
第一篇：pcr实验室检查要点（2016）聚合酶链反应（pcr）检验实验室检查要点指南（2016版）聚合酶链反应检验实验室是指通过基因扩增的方式检测特定的dna或rna的检验实验室。聚合酶链反应（polymerasechainreaction，pcr）是一种在体外特异性扩增靶dna序列的技术，其基本过程为模板双链dna的变性、引物与模板dna的退火和在dna聚合酶引导下的链延伸反应三个阶段的多次循环。每一次循环后的扩增产物均可作为下一轮循环的模板，理论上，扩增产物量呈指数形式上升，即经过n个循环后，产物量增加到2n倍。pcr试剂操作简单，短时间内在体外可获得数百万个特异靶dna序列的复制，为临床……查看全文>>
第一篇：pcr个人经验总结pcr经验总结1.primersdesign这是最重要的一步。理想的，只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火的引物要符合下面的一些条件a足够长，18-24bp，以保证特异性.当然不是说越长越好，太长的引物同样会降低特异性，并且降低产量。bgc%40%-60%c5'端和中间序列要多gc，以增加稳定性d避免3'端gcrich，最后3个base不要有gc，或者最后5个有3个不要是gce.避免3'端的互补，否则容易造成dimerf.避免3'端的错配g.避免内部形成二级结构h.附加序列（rtsite，promotersequence）加到5'端，在算tm值时不需要加上这些序……查看全文>>
第一篇：标准的pcr实验室建设方案标准的pcr实验室建设方案发布时间：2009-11-510：15：17一、主体结构主体为彩钢板、铝合金型材。室内所有阴角、阳角均采用铝合金50内圆角铝，从而解决容易污染、积尘、不易清扫等问题。结构牢固，线条简明，美观大方，密封性好。二、标准的三区分隔和气压调节将pcr过程分成试剂准备、标本制备和pcr扩增检测三个独立的实验区。整个区域有一个整体缓冲走廊。每个独立实验区设置有缓冲区，同时各区通过气压调节，使整个pcr实验过程中试剂和标本免受气溶胶的污染并降低扩增产物对人员和环境的污染。可打开缓冲区Ⅰ，缓冲区Ⅱ和pcr扩增区的排风扇往外排气，在实验区的外墙上和各扇……查看全文>>
第一篇：建立pcr实验室的基本条件建立pcr实验室的基本条件临床基因扩增实验室采用pcr技术用于临床基因诊断，由于pcr技术对所检测的核酸模板进行大量扩增，容易出现实验室污染导致临床检测标本假阳性结果；另外由于pcr技术要求高、影响因素多（特别是rna标本），实验过程处理不当易导致核酸模板无扩增现象，导致临床标本假阴性结果。因此临床基因扩增检验实验室技术验收和规范化管理是pcr技术本身需要，也是在临床上顺利应用该技术前提。二、pcr实验室验收准备工作（一）硬件准备——实验室基本建设1.根据文件要求，临床基因扩增检验实验室原则上分为四个单独的工作区域：试剂贮存和准备区；标本制备区；扩增反应混合物……查看全文>>
第一篇：pcr实验室要求和基本设备pcr实验室的基本设备与要求一、临床基因扩增检验实验室区域设置原则（一）临床基因扩增检验实验室区域设置原则1、试剂储存和准备区2、标本制备区3、扩增反应混合物配制和扩增区4、扩增产物分析区如使用全自动分析仪，区域可适当合并。（二）各工作区域必须有明确的标记，避免不同工作区域内的设备、物品混用。（三）进入各工作区域必须严格按照单一方向进行即试剂储存和准备区—>标本制备区—>扩增反应混合物配制和扩增区—>扩增产物分析区。（四）不同的工作区域使用不同的工作服（例如不同的颜色）。工作人员离开各工作区域时，不得将工作服带出。二、工作区域仪器设备配置标准（一）试剂储存和准……查看全文>>
第一篇：pcr防污染措施【分享】pcr污染与对策pcr污染与对策pcr反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是易污染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生.污染原因（一）标本间交叉污染：标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中，由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散，导致彼此间的污染.（二）pcr试剂的污染：主要是由于在pcr试剂配制过程中，由于加样枪、容器、双蒸水及其它溶液被pcr核酸模板污染.（三）pcr扩增产物污染.这是pcr……查看全文>>
第一篇：pcr实验室审核表临床基因扩增检验实验室技术审核申请表□初次验收□换证验收一、基因扩增检验实验室基本情况（一）实验室所属法人单位名称：地址：邮编：法定代表人：实验室负责人：联系人：email：电话：传真：（二）实验室总人数：名（其中初级职称人员名，占％；中级职称人员名，占％；副高级职称人员名，占％；高级职称人员名，占％。）二、提供资料状况1.医疗机构相关资料（1）《医疗机构执业许可证》复印件；（2）拟设置基因扩增检验实验室医院的医疗卫生资源状况、对临床基因扩增检验的需求情况以及实验室运行的预测分析；2.实验室检查申报表附表1临床pcr实验室基本情况登记表附表2临床pcr实验室检验项目登……查看全文>>
第一篇：pcr实验室工作制度pcr实验室工作制度1.实验室内必须保持安静、整洁，不得大声喧哗，不得在室内从事与实验无关的事宜。2.禁止与实验无关人员出入，实验室主要通道入口及功能区域应有特殊的标志。3.实验室各区域有各自专用的实验设备和器材，包括工作服、拖鞋、洁净鞋，一次性消耗品、办公用品等，各有明显的标志，绝对不能混用。4.严格遵守人员及物品按单向流动，不得交叉混流。5.严格按照基因检测操作规程进行实验和使用仪器设备，定期检测、校准并做好记录工作。6.每次基因检测中应设立阴阳对照。7.实验室工作人员必须严格按照pcr实验室操作程序进行，实验开始前必须做好室内及工作台的清洁消毒，离心管、吸头等……查看全文>>
第一篇：pcr实验室各室工作制度（本站推荐）试剂准备区工作制度一、实验人员进入该区须更换工作服，穿本区专用绿色工作服，戴帽子、口罩及更换专用拖鞋。二、实验员在试剂准备区接收标本、准备实验用的试剂。三、实验员每天收齐标本，验收登记后，将标本通过传递窗送入标本制备区。四、在试剂准备区配置好试剂后放入冰箱内备用。需要时通过传递窗送入标本制备区。五、每天的标本及配置的试剂须登记记录，应书写工整详细，使用本区专用的、带有本室标识的记录本、纸和笔。六、将本区废弃物装入本室垃圾袋中，有专人将垃圾带出实验室交医院集中处理。七、实验后须使用含氯消毒液及75%的乙醇擦拭实验台面，紫外灯消毒30分钟，记录紫外灯、冰……查看全文>>
第一篇：pcr实验室管理制度pcr实验室管理制度1.本实验室进行临床基因扩增检测及相关检验工作，不得进行其他实验操作。2.本实验室采用实时荧光定量pcr技术作为临床基因诊断的主要手段，实验室分为四个区：试剂储存和准备区（第一区）、标本处理区（第二区）、扩增区（第三区）、扩增产物分析区（第四区）。每一工作区配备专用的设备、仪器、辅助设施、耗材、清洁用品、办公用品、专用工作服，并有明显的区分标识，专用工作服。标本的接收则在标本接收处进行。3.各工作区专用的仪器设备、办公用品、工作服、实验耗材和清洁用具等，不可混用。4.严格遵守从“试剂储存和准备区→标本处理区→扩增区→扩增产物分析区”的单一流向制度……查看全文>>
第一篇：（北京市）pcr实验室检查要点企业pcr检验实验室布验收注意事项企业应当提供pcr实验室设计方案和/或平面设计图（应当标明风向或压差梯度）。1.pcr检验实验室与pcr产品生产区域应当在各自独立的建筑物或空间内，保证空气不直接连通，防止扩增时形成的气溶胶造成交叉污染。2.原则上pcr检验实验室应当设置以下区域。试剂储存和准备区、标本制备区、扩增区、扩增产物分析区，根据使用仪器的功能，区域可适当合并。若使用实时荧光定量pcr仪，且不需要进行后续产物分析工作，扩增区、扩增产物分析区可合并。若使用样本处理、核酸提取及扩增检测为一体的自动化分析仪，则标本制备区、扩增区、扩增产物分析区可合并。3……查看全文>>
第一篇：pcr净化实验室整体规划pcr净化实验室设计整体规划1pcr实验室平面布局pcr扩增检验实验室原则上分为四个单独的工作区域。试剂贮存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制和扩增区、扩增产物分析区。为避免交叉污染，进入各个工作区域必须严格遵循单一方向进行，即只能从试剂贮存和准备区→标本制备区→扩增反应混合物配制和扩增区→扩增产物分析区。2实验室空调通风系统设计及压力控制pcr实验室并没有严格的净化要求，但是为避免各个实验区域间交叉污染的可能性，宜采用全送全排的气流组织形式。同时，要严格控制送、排风的比例以保证各实验区的压力要求。2.1pcr试剂贮存和准备区该实验区主要进行的操作为贮存试……查看全文>>
第一篇。pcr扩增过程中污染的预防与对策pcr技术是聚合酶链反应，该技术可将极微量的靶dna特异的扩增上百万倍，从而大大提高对dna分子的分析和检测能力。pcr反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性，操作复杂，所以在其操作过程中常有污染发生，即使极少量的污染也会造成假阳性，稍有差错就会出现假阴性。本文讨论pcr扩增过程中污染的预防与对策。操作者必须熟练掌握技术，严格按操作规程操作，防止假阳性、假阴性结果的产生。污染的原因调查标本间的污染；采集标本的容器被污染；提取过程中加样枪污染；试剂的污染；提取过程中气溶胶的污染等。防止污染的预防与对策实验人员要熟练掌握pcr操作技术，严格规范操作程……查看全文>>
第一篇：建立pcr实验室的基本条件建立pcr实验室的基本条件临床基因扩增实验室采用pcr技术用于临床基因诊断，由于pcr技术对所检测的核酸模板进行大量扩增，容易出现实验室污染导致临床检测标本假阳性结果；另外由于pcr技术要求高、影响因素多（特别是rna标本），实验过程处理不当易导致核酸模板无扩增现象，导致临床标本假阴性结果。因此临床基因扩增检验实验室技术验收和规范化管理是pcr技术本身需要，也是在临床上顺利应用该技术前提。（一）硬件准备--实验室基本建设1、根据文件要求，临床基因扩增检验实验室原则上分为四个单独的工作区域：试剂贮存和准备区；标本制备区；扩增反应混合物配制和扩增区；扩增产物分析区……查看全文>>
第一篇：pcr实验室基本要求pcr实验室基本要求1、主体结构：主体为彩钢板、铝合金型材。室内所有阴角、阳角均采用铝合金50内圆角铝，从而解决容易污染、积尘、不易清扫等问题。结构牢固，线条简明，美观大方，密封性好。2、标准的三区分隔和气压调节：将pcr过程分成试剂准备、标本制备和pcr扩增检测三个独立的实验区。整个区域有一个整体缓冲走廊。每个独立实验区设置有缓冲区，同时各区通过气压调节，使整个pcr实验过程中试剂和标本免受气溶胶的污染并降低扩增产物对人员和环境的污染。可打开缓冲区Ⅰ，缓冲区Ⅱ和pcr扩增区的排风扇往外排气，在实验区的外墙上和各扇门上都安装有风量可调的回风口，空气通过回风口向室内换……查看全文>>
第一篇。各省市pcr上岗证汇总大全根据《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》，技术人员参加省临检中心的pcr上岗证培训班，经过考核合格后方可从事临床基因扩增检验工作。各省临检中心每年举办一次至两次，详见临床检验中心网站通知，上半年的培训已结束，具体情况如下：1、天津参加天津市临床检验中心培训，获得“天津市临床基因扩增检验实验室技术人员上岗证”报名时间：2016年4月15日前（下次待定）报名条件：开展或拟开展临床基因扩增检验项目的实验室人员；从事分子生物学诊断技术（含分子病理）的人员；其它相关人员。培训费用。1600元/人（含理论培训费、实验材料费、资料费）、食宿自理2、浙江省参加“2016……查看全文>>
第一篇：pcr实验室高端pcr实验室控制设计说明pcr实验室即分子生物学实验室，在医疗、科研、生物技术方面得到广泛的应用。因其在不同行业的应用各有区别，在具体设计时也有不同之处，就医疗机构的应用而言，主要使用三区或四区设计，即试剂准备区、样品提取区、扩增分析区；此类三区设计时候应用于类似荧光定量型或同类pcr分析设备，及扩增与分析过程在设备内一次完成。而四区设计在三区的基础上讲扩增分析区拆分为扩增区与分析区适用于其他类型的pcr设备及手工处理。在pcr实验的设计上，经过多年的经验累积，已经在一些关键技术上达成了共识。因为pcr实验中所产生的dna与rna片段过于微小，以至于可以穿透高效过滤器，……查看全文>>
第一篇：pcr实验室简介pcr实验室又叫基因扩增实验室。pcr是聚合酶链式反应（polymerasechainreaction）的简称。是一种分子生物学技术，用于放大特定的dna片段，可看作生物体外的特殊dna复制。通过dna基因追踪系统，能迅速掌握患者体内的病毒含量，其精确度高达纳米级别，精确检测乙肝病毒在患者体内存在的数量、是否复制、是否传染、传染性有多强、是否必要服药、肝功能有否异常改变能及时判断病人最适合使用哪类抗病毒药物、判断药物疗效如何、给临床治疗提供了可靠的检验依据条件1、必须拥有标准的的pcr荧光实验室;实时荧光定量pcr技术于1996年由美国appliedbiosystems……查看全文>>
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