肝糖原的提取.鉴定与定量 肝糖原的提取与鉴定

生物化学实验报告

姓名：

学号：3130010071

专业年级：2013级临床医学

组别：第2实验室

生物化学与分子生物学实验教学中心

实验名称肝糖原的提取、鉴定、分离实验日期2014-12-25合作者评分

陈海玲

教师签名

实验地点

第2实验室

指导老师朱利娜

批改日期

一、实验目的

1、掌握组织样品的制备方法，了解其注意事项。

2、了解肝糖原提取、糖原和葡萄糖鉴定与蒽酮比色测定糖原含量的原理和注意事项，掌握其操作方法。

3、正确操作使用刻度吸管和可调微量取液器。

4、熟练运用溶液混匀的各种方法。

5、正确掌握溶液转移的操作。

6、正确操作使用分光光度计。

二、实验原理

●肝糖原的提取

糖原储存于细胞内，采用淹没匀浆等方法可使细胞破碎，低浓度的三氯醋酸能使蛋白质变性，破坏肝组织中的酶且沉淀蛋白质，而糖原仍稳定地保存于上清液中，从而使糖原与蛋白质等其他成分分离开来。糖原不溶于乙醇而溶于热水，故先用95%乙醇将绿叶中糖原沉淀，再溶于热水中。●糖原的鉴定

糖原水溶液呈乳样光泽，遇碘呈红棕色。这是糖原中葡萄糖长链形成的螺旋中，依靠分子间引力吸附碘分子后呈现的颜色。糖原还可被酸水解为葡萄糖，利用呈色反应和葡萄糖的还原性，可判定肝组织中糖原的的存在。cuso4+2naoh=na2so4+cu（oh）2cu（oh）2+c6h12o6=2cuoh+氧化型葡萄糖+h2o

2cuoh=h20+cu2红色）cu（oh）2====h2黑色）●肝糖原的定量