3.霉菌、放线菌的形态观察 4学时

第一篇：

3.霉菌、放线菌的形态观察4学时实验三

一、实验目的

霉菌、放线菌的形态观察

1.学习并掌握观察放线菌、霉菌形态的基本方法。

2.初步了解放线菌和四类常见霉菌的基本形态特征。

二、实验原理

1.霉菌（真核微生物）：

霉菌是一类可产生菌丝体的真核微生物的统称。霉菌的菌落形态较大，质地疏松，外观干燥，不透明，菌落与培养基间连接紧密，不易挑取，菌落正反面，边缘与中心的颜色、构造通常不一致，有霉味。霉菌的菌丝体分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及包子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。

菌丝的孢子较大，在低倍镜下即可清晰观察到有隔或无隔菌丝和孢子及巨大的孢子囊。霉菌菌丝和孢子的宽度通常比放线菌粗的多，常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍。霉菌菌丝较粗大，细胞易收缩变形，而且孢子很容易飞散，所以制标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液。此染色液制成的霉菌标本片特点是：（a）细胞不变形；（b）具有杀菌防腐作用，且不易干燥，能保持较长时间；（c）溶液本身呈蓝色，有一定染色效果。霉菌的菌丝、分生孢子梗和分生孢子的形态常作为分类的重要依据。

曲霉形态特征。表面灰绿色，菌体有许多复杂的分枝菌丝构成。营养菌丝具有分隔；气生菌丝的一部分形成长而粗糙的分生孢子梗，顶端产生烧瓶形或近球形顶囊，表面产生许多小梗，小梗上着生成串的表面粗糙的球形分生孢子。

根霉形态特征。匍匐菌丝弧形，无色，向四周蔓延。

放线菌形态特征：呈菌丝状生长，以孢子繁殖。显微镜下呈紫红色。青霉形态特征：菌丝初期白色，颜色逐渐由白转变为绿或蓝，菌丝有隔膜。气生菌丝特化成子实体，子实体类型为分生孢子头。

霉菌的培养和观察方法：

（1）载玻片培养观察法。无菌操作将培养基薄层置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌即在载玻片和盖玻片之间有限的空间内沿盖玻片横向生长。培养一定时间后，将载玻片上的培养物置于显微镜下观察，这种方法既可以保持霉菌自然生长状态，还便于观察不同发育期的培养物。

（2）玻璃纸培养观察法。与放线菌的玻璃纸培养观察方法相似，这种方法用于观察不同生长阶段霉菌的形态，也可获得良好的效果。

（3）直接制片观察法。用解剖针挑取少量培养物置于预先滴加乳酸石炭酸棉蓝染色液中，制成霉菌制片镜检。

2.放线菌（原核微生物）

放线菌是由不同长短、纤细的菌丝所形成的单细胞菌丝体。菌丝体分为两部分，即潜入培养基中的营养菌丝（或称基内菌丝，简称基丝）和生长在培养基以上的气生菌丝（简称气丝）。有些气生菌丝分化成孢子丝，呈螺旋形、波浪形或分枝状等，孢子常呈圆形、椭圆形或杆状。能否产生气生菌丝及孢子的形状和颜色常作为放线菌分类鉴定的重要依据。

放线菌的菌落形态特征为。形成干燥、不透明、表面呈致密丝绒状，上有一层彩色“干粉”的菌落。菌落与培养基连接紧密，难以挑取，菌落正反面颜色不一致，在菌落边缘的琼脂平板上有变形的现象，有泥腥味。

放线菌只产生基丝而无气丝。放线菌的培养和观察方法。

放线菌在显微镜下一般气丝在上，基丝在下，气丝色暗，基丝较透明。有的（1）扦片法：在放线菌平板上扦上盖玻片后培养，使放线菌菌丝沿着培养基表面与盖玻片的交接处生长而附着在盖玻片上。观察时用镊子拔出盖玻片，擦去背面培养物，将有菌的一面朝上置于载玻片上，直接镜检。

宜用略暗光线观察，低倍镜—高倍镜；染色后观察效果更好。