ABO血型操作

第一篇：abo血型操作长春博迅abo、rhd血型定型检测卡操作流程【检验原理】

本试验采用排阻层析原理，即在微柱凝胶介质中，红细胞抗原与相应抗体结合，形成红细胞免疫复合物，在一定离心力下，该复合物不能通过凝胶间隙而浮于胶表面或悬于胶中；如无相应抗体结合，则不能形成红细胞免疫复合物，在一定的离心力下，分散的红细胞可以通过凝胶间隙沉于微柱腔底部。【样本要求】

标本采集。采集被检对象静脉血，将该同一人血液分别制备成红细胞标本和血清标本。

红细胞标本的制备。配制成0.5％-0.8％红细胞悬液。

血清标本的制备。将被检者静脉血采入含兔脑粉或其它促凝剂的试管中，10分钟后离心，2000rpm，10分钟，取上清；或者将被检者静脉血采入无抗凝试管中，4℃放置12小时，或37℃放置2小时后离心，2000rpm，10分钟，取上清。该上清不得有絮状物或沉淀。标本必须充分去纤维蛋白，否则血清标本中析出的或红细胞悬液中残余的纤维蛋白可阻碍红细胞沉降，使非凝集细胞离心后在胶表面形成一条红线，呈假阳性反应。【操作步骤】

1.将微柱凝胶试剂卡的六支凝胶微管标号。

2.将待检者0.5％-0.8％红细胞悬液分别加入第一至第四支微管中，每管50微升。

3.将待检者血清分别加入第五支和第六支

第二篇：abo血型鉴定生理盐水凝集法

①玻片法。操作简单，适于大量标本检查，但反应时间长；被检查者如血清抗体效价低，则不易引起红细胞凝集，因此，不适于反向定型。

②试管法。由于离心作用可加速凝集反应，故反应时间短，而且，借助于离心力可以使红细胞接触紧密，促进凝集作用，适于急诊检查。

红细胞亚型抗原性弱，如抗a抗b标准血清效价低时，易造成漏检或误定。如加用o型（抗a、b）血清和反向定型，可避免此类错误。

玻片法凝集结果判断。红细胞呈均匀分布，无凝集颗粒，镜下红细胞分散。

在低倍镜下凝集程度强弱判断标准：

①呈一片或几片凝块，仅有少数单个游离红细胞为（++++）。

②呈数个大颗粒状凝块，有少数单个游离红细胞为（+++）。

③数个小凝集颗粒和一部分微细凝集颗粒，游离红细胞约占1／2为（++）。

④肉眼可见无数细沙状小凝集颗粒。于镜下观察，每凝集团中有5～8个以上红细胞凝集为（+）。

⑤可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多的游离红细胞（±）。

⑥可见极少数红细胞凝集，而大多数红细胞仍呈分散分布为混合凝集外观。

⑦镜下未见细胞凝集，红细胞均匀分布为（-）。凝胶微柱法

是红细胞抗原与相应抗体在凝胶微柱介质中发生凝集反应的免疫学方法。血型抗体为单克隆抗体，加入试剂、标本，用专用离心机离心后可直接用肉眼观察结果或用血型仪分析。此法操作标准化，定量加样，确保结果准确性。

抗a、抗b和抗ab标准血清标准

准血清均采自健康人，并应符合下述条件：①特异性：只能与相应的红细胞抗原发生凝集，无非特异性凝集。②效价：我国标准抗a和抗b血清效价均在1：128以上。③亲和力：我国标准要求抗a对a

1、a2及a2b发生反应开始出现凝集的时间分别是15s、30s和45s；抗b对b型红细胞开始出现凝集的时间为15s。凝集强度为3min时，凝块不小于1mm2。④冷凝集素效价：在1：4以下。⑤无菌。⑥灭活补体。[3]编辑本段注意事项

1、所用器材必须干燥清洁、防止溶血，凝集和溶血的意义一样。为避免交叉污染，建议使用一次性器材。标准血清从冰箱取出后，应待其平衡至室温后再用，用毕后应尽快放回冰箱保存。

2、加试剂顺序。一般先加血清，然后再加红细胞悬液，以便核实是否漏加血清。